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| CAS1135-40-6 CAPS與Tris在電泳實驗的應(yīng)用 |
CAPS試劑即環(huán)己胺丙磺酸，是一種氨基磺酸鹽，具有兩性，應(yīng)用最廣泛的就是在水性聚異氰酸酯涂料中以及HPLC分離、SDS-PAGE凝膠電泳等生化實驗的生物緩沖液中。
作為生物緩沖液時，CAPS與Tris、MOPS類似，都可用于電泳緩沖液，但又有區(qū)別，我們可以先了解下電泳緩沖液的要求。電泳是指帶電粒子在電場作用下，想著與其電性相反的電極移動，在確定條件下，帶電粒子的移動速率（遷移率）固定。生化實驗中，帶電粒子通常是蛋白質(zhì)膠粒、核酸等，不同的蛋白質(zhì)或核酸遷移率不同，從而會相互分離。由于蛋白質(zhì)和核酸顆粒對pH非常敏感，所以電泳液中必須加入緩沖劑來保護蛋白質(zhì)或者核酸。
環(huán)己胺丙磺酸CAPS
在外加電場的電壓固定和電泳時間等條件相同時，不同的電泳粒子遷移率不同，所以蛋白質(zhì)或核酸的大小不同或種類不同，遷移率就不同。不同粒子的遷移率差值即分開距離與電壓和電泳時間成正比。根據(jù)電泳粒子的大小不一，其使用的電泳緩沖液也不一樣。
CAPS緩沖液：適用于高分子量的蛋白質(zhì)（大于20KD）的電泳，即western blot。由于CAPS制成的電泳緩沖液中只含有EDTA、甲醇，蛋白質(zhì)凝膠電泳PVDF不僅用于蛋白質(zhì)的分離，也可以用于后續(xù)的蛋白質(zhì)測序。
Tris緩沖液：通常用于核酸DNA的電泳，即Southern blot。其中TEA用于大于13kb的DNA片段，分離效果好，可用于回收DNA；TBA用于小于1kb的DNA 片段，不過其中的硼酸會影響DNA回收及后續(xù)的酶反應(yīng)實驗。Tris也可以用于低分子量蛋白的印跡實驗，不過要進行蛋白質(zhì)測序時不能用帶有甘氨酸，需要用Tris-Tricine+EDTA緩沖體系。
MOPS緩沖液：電泳時通常用于配制RNA電泳緩沖液，即Northern blot。
除了上述的CAPS、Tris、MOPS之外，還有一些其它的電泳緩沖液，在整個電印跡實驗中，緩沖液的成本與核酸染料、蛋白質(zhì)等比起來占比是較少的，建議使用優(yōu)質(zhì)的緩沖劑原料確保實驗效果，德晟專門從事各種生物緩沖劑研發(fā)生產(chǎn)的，可以滿足不同實驗的緩沖劑要求。 |
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