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廣州輝駿生物科技股份有限公司
| 聯(lián)系人：輝駿生物
先生 (經(jīng)理) |
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手 機(jī)：18820789842  |
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| Flag-TST雙標(biāo)簽免疫沉淀/免疫共沉淀試劑盒 |
描述
雙標(biāo)簽免疫沉淀/免疫共沉淀試劑盒，包含足夠完成 20 個(gè)反應(yīng)的試劑，每個(gè)TAP反應(yīng)，TST樹(shù)脂需要 100μL，flag樹(shù)脂需要 50 μL。
儲(chǔ)存條件 收到本產(chǎn)品后flag樹(shù)脂和洗脫液于 -20 ℃ 貯存，其他產(chǎn)品于 4 ℃ 貯存。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 輝駿生物雙標(biāo)簽免疫沉淀 /免疫共沉淀試劑盒能夠高效完成單標(biāo)簽融合蛋白或雙標(biāo)簽融合蛋白免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)。以雙標(biāo)簽融合蛋白做TAP為例，將Flag標(biāo)簽、TST標(biāo)簽與誘餌蛋白在目的細(xì)胞中融合表達(dá)，*一步用TST樹(shù)脂來(lái)粗調(diào)取誘餌蛋白的互作蛋白，然后將這一步的洗脫液加入到第二步Flag樹(shù)脂中來(lái)更進(jìn)一步調(diào)取誘餌蛋白的互作蛋白。本試劑盒不僅可以調(diào)取Flag或TST單標(biāo)簽融合蛋白及其互作蛋白，又可以調(diào)取Flag和TST雙標(biāo)簽融合蛋白及其互作蛋白，另外相對(duì)于傳統(tǒng)的Flag-HA IP試劑盒，本試劑盒具有產(chǎn)物中不含抗體且蛋白沒(méi)有變性的優(yōu)點(diǎn)，其產(chǎn)物做Western Blot檢測(cè)時(shí)不會(huì)受IgG影響，*后本試劑盒中親和材料與誘餌蛋白結(jié)合多且強(qiáng)，調(diào)取的互作蛋白更多。
FLAG-tag 是一段由8個(gè)氨基酸殘基組成，N-DYKDDDDK-C (1012 Da)，其作用是標(biāo)記蛋白。在蛋白表達(dá)和定位研究中，可以通過(guò)基因工程技術(shù)手段將所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列連接起來(lái)，可以連接在目的蛋白的C端或N端，然后將整合后的基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞中或胚胎干細(xì)胞亦或受精卵中。TST標(biāo)簽是strep-tagⅡ（Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys）的升級(jí)版，由兩個(gè)strep-tagⅡ外加連接臂組成，與融合蛋白結(jié)合能力更強(qiáng)，結(jié)合位點(diǎn)更多，其作用是標(biāo)記蛋白。在蛋白表達(dá)和定位研究中，可以通過(guò)基因工程技術(shù)手段將所要研究的目的基因和TST-tag基因序列連接起來(lái)，可以連接在目的蛋白的C端或N端，然后將整合后的基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞中或胚胎干細(xì)胞亦或受精卵中。
流程簡(jiǎn)述 1. 將細(xì)胞裂解液與TST樹(shù)脂，室溫下孵育 1-2 小時(shí)，或 4 ℃過(guò)夜。
2. 在室溫下，經(jīng)過(guò)漂洗，洗脫得到洗脫液1。
3. 在洗脫液1中加入到Flag樹(shù)脂中，室溫孵育 2-3 小時(shí)，或 4 ℃過(guò)夜。
4. 室溫下，漂洗，加洗脫緩沖液B得到洗脫復(fù)合物。
所需額外試劑和儀器 • 磷酸鹽緩沖液（PBS，100 mM 磷酸鈉，100 mM 氯化鈉；pH 7.2）
• Flag抗體
• TST抗體
• 混勻儀 |
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