蜂王漿是公認(rèn)的可供人類直接服用的高活性成分的營養(yǎng)食品。10-羥基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王漿中特有的一種不飽和脂肪酸，由于這種酸在自然界的其它物質(zhì)中沒有，只存在于蜂王漿中，所以也稱為王漿酸。分離出的純王漿酸呈白色晶體，在新鮮的蜂王漿中多以游離形式存在，性質(zhì)比較穩(wěn)定，具有較好的殺菌、抑菌、抗疲勞、抗衰老作用和抗Ai、抗放射的功能，為此許多保健食品均添加有蜂王漿。因此作為評價蜂王漿及其制品質(zhì)量優(yōu)劣的主要指標(biāo)之一的10-HDA含量測定顯得尤其重要。目前，比較通用的是HPLC法。液相法處理簡單、結(jié)果準(zhǔn)確，潤揚儀器公司基于以上情況，建立了超聲提取、冷藏沉淀后，用對羧基苯甲酸乙酯做內(nèi)標(biāo)，反相液相色譜法測定蜂王漿及其制品中10-HDA含量的方法，取得了令人滿意的結(jié)果。
一、儀器主要配置和檢測分析條件：
(1)、主要儀器配置：
1、LC-3000高效液相色譜儀；2、色譜柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5；3、高速離心機（大于4500r/min；50ml）4、超聲波震蕩儀；5、渦旋混合器；6、分析天平（萬分之一）；7、溶劑過濾器（帶0.45um有機、水系過濾膜和真空）。
（2）、主要試劑：
純凈水、甲醇、乙醇、對羥基苯甲酸甲酯、10-HAD標(biāo)準(zhǔn)品
（3）、色譜條件：
色譜柱為Kromasil C18 柱，流動相為V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2，流速1.0ml/min，對羧基苯甲酸乙酯作內(nèi)標(biāo)，檢測波長210nm。本法簡單、快速、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，回收率高(97.6%～101.8%)。
（4）.樣品處理
樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻，取約0.5g，置于已稱定的50ml容量瓶中，稱定，加0.03mol/L鹽酸1ml和水2ml，置漩渦混合器上混合使樣品溶解，加無水乙醇30ml，邊加邊輕輕搖動，再加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，并用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，立即置超聲波中超聲15min，或置漩渦混合器上振蕩15min，取出，在3000r/min下離心10min后測定。如不能及時測定，應(yīng)放置在冰箱中冷藏待測。 |
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